The EOS 5D Mark II tiene una impresionante capacidad de capturar vídeo de alta calidad, incluso en las más ligeras gracias a su sensor de gran tamaño, a pantalla completa. En sus valores ISO de configuración estándar se pueden ajustar de 100 a 6400. Función Activación de encargo C.Fn1-3 permite que la gama que se extiende desde 50 a 25.600, mediante la activación de la "L" (50 ISO), 'H1' (ISO 12.800 ) y 'H2' (ISO 25.600) ajustes. Con los mejores resultados de vídeo serán capturadas en el rango ISO de 100 a 1600. Cuando se trabaja en condiciones de poca calidad de la luz será mejorada por dejar caer la velocidad de obturación a 1/30 seg o mediante el uso de una lente más rápido en lugar de aumentar la velocidad ISO más allá de 1600.